Invitrogen™ CellSensor™ NFAT- bla CHO-K1 cellinje

Superfamiljen G-proteinkopplade receptorer (GPCR) består av uppskattningsvis 600-1 000 medlemmar och är den största kända klassen av molekylära mål med bevisat terapeutiskt värde. GPCR är avgörande för överföringen av ett brett spektrum av kemiska meddelanden från den extracellulära miljön till det inre av cellen. GPCR är involverade i ett brett spektrum av störningar, inklusive allergier, kardiovaskulär dysfunktion, depression, fetma, cancer, smärta, diabetes och olika störningar i centrala nervsystemet. GPCR-signalering medieras av trimera G-proteiner som innehållerα ,β , ochγ subenheter och kan kategoriseras i signaleringsklasser baserat på subenhetssammansättning. G alfa, G alfa och G alfa i/o proteiner förmedlar intracellulär signalering genom aktivering av signalvägar som leder till distinkta fysiologiska slutpunkter. Aktivering av G alfa s och G alfa i/o kopplade receptorer leder till stimulering eller hämning av adenylatcyklas, respektive; aktivering av G alfa q-kopplade receptorer resulterar i stimulering av fosfolipas C. GPCR-signalering genom dessa distinkta vägar kan övervakas genom aktivering av specifika transkriptionssvarselement placerade uppströms om en reportergen. Invitrogen har utvecklats GeneBLAzer™ Mastercellinjer som använder beta-laktamas-reportersystemet, som kan användas för att screena för både agonister och antagonister av GPCR som kopplar till var och en av ovanstående signalvägar. Dessa cellbaserade analyser använder sig av ett membrangenomträngande fluorescerande substrat (CCF4-AM eller CCF2-AM), vilket möjliggör en ratiometrisk avläsning som minskar fel på grund av provvariabilitet, leder till utmärkta Z'-faktorvärden och möjliggör analysminiatyrisering. GeneBLAzer™ Mastercellinjer med antingen NFAT- eller CRE-svarselement finns tillgängliga i Jurkat, CHO-K1 eller FreeStyle™ 293F-cellbakgrunder (totalt sex cellinjer) för utveckling av analyser i suspensions- eller adherentcellformat. Stabila cellinjer som använder ett NFAT-svarselement uppströms beta-laktamasgenen är designade för studier av Gq-kopplade receptorer. Stabila cellinjer som använder cAMP-responselementet (CRE) uppströms om beta-laktamasgenen är designade för studier av Gs _- kopplade receptorer. FreeStyle™ 293F-celler är HEK 293-celler som har anpassats för tillväxt i suspension i serumfritt medium. Alternativt kan dessa celler odlas i närvaro av serum för användning i det adherenta formatet. Akademiska och ideella kunder, vänligen fråga efter specialpriser.