missing translation for 'onlineSavingsMsg'
Läs mer
  1. Home
  2. Products
  3. Proteinanalysreagenser
  4. Gene Reporter System
  5. 10206432

Invitrogen™ BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP

Produktkod. 10206432
Klicka för att se tillgängliga alternativ
Kvantitet:
20 reaktioner
Förpackningsstorlek:
Varje
Denna artikel kan inte returneras. Se returpolicy

For Research Use Only. All usage must comply with product instructions.

Produktkod. 10206432

Brand: Invitrogen™ K493600

Vänligen för att beställa denna produkten. Behöver du ett Webbkonto? Registrera ditt konto idag!

Denna artikel kan inte returneras. Se returpolicy

For Research Use Only. All usage must comply with product instructions.

Beskrivning

Innehåller

BLOCK-iT ™Pol II miR RNAi Expression Vector Kit innehåller två lådor. Kloningsboxen innehåller linjäriserad pcDNA ™6,2-GW/miR, 10X hybridiseringsbuffert, T4 DNA-ligas, 5X DNA-ligeringsbuffert, lacZ-kontrolloligo, lacZ-kontrollplasmid, negativ kontrollplasmid, DNas/RNasfritt vatten och framåt- och bakåtsekvenseringsprimrar.

Kombinerar fördelarna med traditionella RNAi-vektorer (stabilt uttryck och förmågan att använda virustillförsel) med kapacitet för vävnadsspecifikt uttryck och multipla målavbrott från samma transkript

pcDNA 6.2-™GW/EmGFP-miR-vektorn som ingår i BLOCK-iT Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP är designat för att uttrycka artificiella miRNA som är konstruerade för att ha 100 % homologi med din målsekvens och kommer att resultera i målklyvning. Denna vektor inkluderar flankerande och loop-sekvenser från ett endogent miRNA som styr excision av det konstruerade miRNA från ett längre Pol II-transkript (pre-miRNA). Använder Invitrogen's prisbelönt BLOCK-iT RNAi Designer, över 70% av konstruktionerna producerar mer än 70% knockdown. Pol II-uttryck av konstruerade miRNA möjliggör:

  • Starkt uttryck från CMVs omedelbara tidiga promotor, med möjlighet att använda vävnadsspecifika eller andra reglerade promotorer via MultiSite Gateway™ rekombination
  • Samcistroniskt uttryck av en Emerald GFP (EmGFP) reporter i pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-vektorn, vilket resulterar i mycket stark korrelation av EmGFP-uttryck med knockdown-aktiviteten hos ditt miRNA
  • Kompatibilitet med många av Invitrogen's Gateway destination (DEST) vektorer för genuttryck; inklusive lentivirala vektorer för stabil transduktion av delande, icke-delande och primära celltyper, Flp-In™ system för kromosomal integration på en plats och alternativa reporterfusionskonstruktioner
  • Uttryck av mer än en konstruerad miRNA på samma transkript, vilket möjliggör knockdown av flera gener samtidigt och generering av syntetiska fenotyper
Hur det fungerar
För höga nivåer av uttryck av din miR RNAi-sekvens inkluderar pcDNA6.2-GW/miR-vektorn CMV-promotorn. Ange helt enkelt ett RefSeq-accessionsnummer eller en nukleotidsekvens i gratis online BLOCK-iT RNAi Designer och programvaran kommer att designa optimerade miRNA som har 100% homologi med målet av intresse. Klona miRNA i vektorn med hjälp av ett snabbt ligeringsprotokoll och transfektera för omedelbart miRNA-uttryck. Uttryckt miRNA bearbetas av det endogena cellulära maskineriet i kärnan (inklusive Drosha) och transporteras sedan in i cytoplasman där det vidarebearbetas av Dicer. Det fullständigt bearbetade miRNA:t inkorporeras sedan i RISC där det fungerar som ett siRNA och resulterar i klyvning av mRNA-målet.
För en mängd olika uttrycksalternativ kan miRNA-kassetten, som innehåller EmGFP, miR-flankerande regioner och en miRNA som är homolog med målet av intresse, lätt flyttas till en mängd olika DEST-vektorer. Detta sker genom Gateway-rekombinationsreaktioner där miRNA-kassetten överförs till en pDONR™ vektor (BP-reaktion) och sedan in i en valfri DEST-vektor (LR-reaktion).

Kloning, gatewaykloning, RNAi, RNAi, epigenetik och icke-kodande RNA-forskning, vektorbaserad RNAi

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Specifikationer

Produkttyp RNAi Expression Vector Kit
Gen GFP (EmGFP)
Innehåll och lagring BLOCK-iT ™Pol II miR RNAi Expression Vector Kit innehåller två lådor. Kloningsboxen innehåller linjäriserad pcDNA ™6.2-GW/EmGFP-miR, 10X hybridiseringsbuffert, T4 DNA-ligas, 5X DNA-ligeringsbuffert, lacZ-kontrolloligo, lacZ-kontrollplasmid, negativ kontrollplasmid, DNas/RNasfritt vatten och framåt- och bakåtsekvenseringsprimrar. Förvara vektorerna, buffertarna, kontrolloligo och plasmider, vatten och sekvenseringsprimrar vid -20 °C. Den ena Shot™ lådan innehåller transformationsreagens inklusive tjugoen 50-μ l alikvoter av One Shot™ TOP10 Kemiskt kompetent E. coli, SOC-medium och en pUC19 supercoiled kontrollplasmid. Förvara dessa transformationsreagenser -80 °C. Alla reagenser är garanterade stabila i 6 månader när de förvaras på rätt sätt.
Kloningsmetod Gateway™
Konstitutivt eller inducerbart system Konstitutiv
Leveranstyp Transfektion
RNAi typ miRNA [mikroRNA]
Urvalsagent (eukaryot) Blasticidin
Vektor BLOCK-iT RNAi vektorer
Promotor CMV
Formatera Kit
Produktlinje BLOCK-iT , Gateway
Kvantitet 20 reaktioner
Visa mer Visa mindre

Endast för forskning. Ej för diagnostik.

Korrigering av produktinnehåll

Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.

Produkttitel

Genom att klicka på Skicka bekräftar du att du kan bli kontaktad av Fisher Scientific angående feedbacken du har lämnat i detta formulär. Vi kommer inte att dela din information för andra ändamål. All kontaktinformation som tillhandahålls ska också underhållas i enlighet med vår Sekretesspolicy.

Tack! Din feedback har skickats. Fisher Scientific arbetar alltid för att förbättra vårt innehåll åt dig. Vi uppskattar din feedback.