Invitrogen™ En Shot™ TOP10F' Kemiskt kompetent E. coli

One Shot TOP10F´ Kemiskt kompetenta E. coli är identiska med TOP10 celler, med tillägg av ett F´ episom. F´ episom bär en tetracyklinresistensgen och tillåter isolering av enkelsträngat DNA (ssDNA) från vektorer som har ett fl-replikationsursprung. Dessutom har F´ episom bär lac Iq-repressorn för inducerbart uttryck från trc- , tac- och lac- promotorer med användning av IPTG.

TOP10F´ kompetenta celler tillhandahålls med en transformationseffektivitet av> 1 x 10 ⁹ cfu/μ g supercoiled DNA och är idealiska för högeffektiv kloning och plasmidförökning.

Som ett derivat av TOP10 , TOP10F´ Kemiskt kompetenta E. coli -celler bär mutationer i det metyleringsberoende restriktionssystemet ( mcr A, mcr BC och mrr ) vilket gör att de kan klona både prokaryot och eukaryot genomiskt DNA och ge effektiv plasmidräddning från eukaryota genom. TOP10F´ celler bär också rec A1- och slut -A1-mutationer som ökar insättningsstabiliteten och förbättrar kvaliteten på plasmid-DNA framställt från minipreps.

One Shot TOP10F´ Kemiskt kompetenta E. coli -celler erbjuder:
• Transformationseffektiviteter av> 1 x 10 ⁹ cfu/μ g
• Stabil F´ episom som tillåter isolering av ssDNA och bär lac Iq-repressor för inducerbart uttryck från trc- , tac- och lac- promotorer
•hsd R för effektiv transformation av ometylerat DNA från PCR-amplifieringar
•mcr A för effektiv transformation av metylerat DNA från genomiska preparat
•lac Z MΔ15 för blå/vit färgscreening av rekombinanta kloner på plattor som innehåller X-Gal eller Bluo-Gal
•ände A1 för renare DNA-preparat och bättre resultat i nedströmsapplikationer på grund av eliminering av ospecifik nedbrytning av endonukleas I
•rec A1 för minskad förekomst av ospecifik rekombination i klonat DNA

Obs: IPTG-induktion krävs för blå-vit färgscreening.

Enkelt att använda One Shot-format
TOP10 F´ Kemiskt kompetenta E. coli -celler levereras i det bekväma, enreaktionsformatet One Shot. Engångsformatet för engångsrör gör att alla steg i transformationsprotokollet, upp till plätering, kan ske i samma rör, vilket sparar tid och förhindrar kontaminering.

Genotyp F {
´lac Iq, Tn 10(TetR)} mcr AΔ ( mrr - hsd RMS- mcr BC)φ 80 lac Z MΔ15Δlac X74 rec A1 ara D139Δ ( ara-leu )7697 gal U gal K rps L(StrR) end A1 nup G

Hitta de stammar och format som passar dina behov
• DH-stammar finns i kemiskt kompetenta och elektrokompetenta cellformat.
• För applikationer med hög genomströmning finns det en mängd olika TOP10 spänner in MultiShot format.
• För ssDNA-produktion prova stammar som TOP10F´ (Kat. Nr. C303003) eller elektrokompetent DH12S (Kat. Nr. 18312017).