Molecular Probes™ pHrodo™ Röd och grön epidermal tillväxtfaktor (EGF) och pHrodo™ Röda transferrinkonjugat

De pHrodo Röd och pHrodo Grön epidermal tillväxtfaktor (EGF) konjugat består av pHrodo Röd eller pHrodo Grönt färgämne direkt konjugerat till en mycket aktiv human rekombinant EGF-molekyl och används för detektion av internaliserad EGF-receptor i celler. Fluorescensmärkt EGF har gjort det möjligt för forskare att undersöka receptor-membran-interaktioner, studera receptorfördelning, beräkna hastighetskonstanter för interaktionen mellan EGF och dess receptor och mer. Fluorescerande etiketter som svarar på en pH-förändring lägger till ytterligare en nivå av detektion.

pHrodo Rött transferrinkonjugat består av pHrodo Rött färgämne direkt konjugerat till en mycket aktiv transferrinmolekyl och används för detektion av internaliserat transferrin i celler. Transferrin är ett monomert serumglykoprotein (∼ 80 000 dalton) som binder till en specifik receptor på ytan av ryggradsdjursceller och levererar upp till två Fe3 ⁺ -atomer via receptormedierad endocytos. När väl järnbärande transferrinproteiner är inne i endosomerna, gynnar den sura miljön dissociation av järn från –transferrinreceptorkomplexet. Efter frisättningen av järn återvinns apotransferrinet till plasmamembranet, där det frisätts från sin receptor för att avlägsna mer järn.

Den mycket fotostabila pHrodo Röd och pHrodo Gröna färgämnen är svagt fluorescerande utanför cellerna vid neutralt pH, men när de internaliseras specifikt genom EGF eller transferrinendocytos, blir de ljust fluorescerande i sura endosomer. Detta möjliggör mätning av internaliserad EGF eller transferrin, såväl som dynamisk övervakning av EGF eller transferrininternalisering i levande celler.

De pHrodo Red EGF Conjugate and the pHrodo Rött transferrinkonjugat har excitations-/emissionsspektra på 560/585 nm och kan multiplexeras med en mängd olika blå, röda och långt röda färgreportrar som Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Röd, NucBlue , RFP:er och Mitotracker Deep Red, bland många andra. De pHrodo Grönt EGF-konjugat har excitations-/emissionsspektra på 509/533 nm och kan multiplexeras med en mängd olika blå, röda och långt röda färgreportrar som Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Röd, NucBlue , RFP:er och Mitotracker Deep Red, bland många andra.

De pHrodo Röd och pHrodo Gröna EGF-konjugat och pHrodo Rött transferrinkonjugat är kompatibla i applikationer inklusive traditionell fluorescensmikroskopi, screening med högt innehåll (HCS), flödescytometri och mikroplattbaserad fluorimetri eller screening med hög genomströmning (HTS). Konjugaten är också kompatibla med olika bredfälts- eller konfokala fluorescensmikroskop, flödescytometrar, fluorescensplattläsare och höginnehållsinstrument.