Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit för subkloning, utan kompetenta celler

Varje kit använder pCR™ 2.1-TOPOTA-vektor med lämpliga restriktionsställen för subkloning. Kloningssatserna är tillgängliga med en mängd olika kompetenta celler (tillgängliga separat) eller utan kompetenta celler, beroende på dina behov och budget. Resistent mot Kanamycin (KanR) och Zeocin™ (ZeoR).

pCR™ 2,1-TOPO; TA vektor: kloning och subkloning
enkelhet pCR 2.1-TOPO TA-vektor linjäriseras med 3'-tymidin (T) överhäng för direkt ligering avTaq polymerasförstärkta –PCR-produkter (TA-kloning) och är“ aktiveras” med kovalent bundet Topoisomeras I. Det finns inget behov av att lägga till ligas och kloningen är klar på 5 minuter. EcoRI-ställen som flankerar PCR-produktinsättningsstället möjliggör enkel excision av inlägg eller använd valfri kombination av 15 bekväma restriktionsställen som flankerar din PCR-insättning för enkel, riktad subkloning.

pCR 2.1-TOPO TA klon urval och
manipulation pCR 2.1-TOPO TA-vektor innehåller både ampicillin- och kanamycinresistensmarkörer och Lac Z-genen förα blå/vit screening.

Förenklat TOPO -baserad kloning med
hjälp av TOPO kloningsteknologi, finns det inget behov av PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpreparering eller andra tidsintensiva DNA-manipulationssteg. Lägg bara till din PCR-reaktion direkt till den medföljande topoisomerasladdade vektorn, inkubera 5 minuter och transformera E. coli -kompetenta celler.

Effektiv kloning Med
upp till 95 % av klonerna som bär det önskade inlägget kan du screena färre kloner, vilket sparar tid och pengar. De pCR 2.1-TOPO TA-vektor som används i detta kit kommer med 3'-T överhäng för effektiv ligering avTaq –polymerasförstärkta PCR-produkter, som innehåller 3'-A-överhäng.

Standarden inom kloning
När det gäller kloning, TOPO kloningsteknik har varit en pålitlig partner för tusentals forskare i över tio år. Snabb, enkel att använda och effektiv, TOPO kloning har tillämpats på många olika vektorer för ett brett spektrum av tillämpningar.

TOPO TA Cloning Kit för subkloning: kit
alternativ Den TOPO TA Cloning Kit för sekvensering kan köpas med en mängd olika kompetenta celler som ger olika fördelar beroende på dina behov:

• Allmän kloning: TOP10 celler (kat. nr. K4500-01, K4500-40)
• Högeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat. nr. K4560-01, K4560-40)
• Allmän kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R-celler (kat. nr. K4520-01, K4520-40)
• Snabb tillväxt: Mach1™ -T1R kemiskt kompetent E. Coli (kat. nr. K4510-20)
• Tillhandahåll din egen: för flexibilitet och för att spara pengar (kat.nr. 450641)

• Snabbt och enkelt: gå från PCR till kloner i bara tre steg och på så lite som 5 minuters praktisk tid
• Effektiv: få upp till 95 % kloner med korrekt infogning
• Beprövad: pålitlig prestanda i över ett decennium med över 4 000 citeringar
• Enkelt: ingen ligas, post-PCR förfaranden eller PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser krävs
• Vektor: pCR 2.1-TOPO TA vektor: subkloningsvektor med 15 bekväma restriktionsställen som flankerar ditt inlägg för enkel, riktad subkloning
• Kloningsmetod: TOPO TA-kloning: Topoisomeras I-–baserad, 5-minuters ligering av PCR-produkter med 3′ -A överhäng (Taq polymeras amplifierat) till TOPO vektor med T överhäng
• Kompetenta celler: olika alternativ: välj från kit med antingen generella, högeffektiva, bakteriofag T1-–resistenta, snabbväxande kompetenta celler (tillgängliga separat) eller använd dina egna

Kloning, PCR Kloning