Invitrogen™ TOP10F' Electrocomp™ Utrustning

TOP10F´ Electrocomp Kit E. coli -celler är identiska med TOP10 celler, med tillägg av ett F´ episom. F´ episom bär tetracyklinresistensgenen och tillåter isolering av enkelsträngat DNA (ssDNA) från vektorer som har ett fl-replikationsursprung. Dessutom har F´ episom bär lac Iq-repressorn för inducerbart uttryck från trc- , tac- och lac- promotorer med användning av IPTG.

TOP10F´ kompetenta celler transformeras via elektroporering, vilket uppnår högre transformationseffektivitet än kemiskt kompetenta celler och kan användas i mer utmanande tillämpningar, inklusive kloning av en låg mängd DNA eller cDNA och gDNA-bibliotekskonstruktion. Dessa celler tillåter stabil replikation av plasmider med högt kopietal och tillhandahålls med en transformationseffektivitet på> 1 x 10 ¹⁰ cfu/μ g supercoiled DNA och är idealiska för högeffektiv kloning och plasmidförökning.

Som ett derivat av TOP10 , TOP10F´ celler bär mutationer i det metyleringsberoende restriktionssystemet ( mcr A, mcr BC och mrr ) vilket gör att man kan klona både prokaryot och eukaryot genomiskt DNA, såväl som effektiv plasmidräddning från eukaryota genom. I likhet med andra DH-stammar är TOP10 stam har också rec A1 och slut A1 mutationer för att öka insättningsstabiliteten och förbättra kvaliteten på plasmid-DNA framställt från minipreps.

TOP10F´ Electrocomp Kit E. coli -celler erbjuder:
• Transformationseffektiviteter av> 1 x 10 ¹⁰ cfu/μ g
• Stabil F´ episom som tillåter isolering av ssDNA och bär lac Iq-repressor för inducerbart uttryck från trc- , tac- och lac- promotorer
•hsd R för effektiv transformation av ometylerat DNA från PCR-amplifieringar
•mcr A för effektiv transformation av metylerat DNA från genomiska preparat
•lac ΔZ M15 för blå/vit färgscreening av rekombinanta kloner på plattor innehållande antingen X-Gal eller Bluo-Gal
•ände A1 för renare DNA-preparat och bättre resultat i nedströmsapplikationer på grund av eliminering av ospecifik nedbrytning av endonukleas I
•rec A1 för minskad förekomst av ospecifik rekombination i klonat DNA

Obs: TOP10F´ celler kräver IPTG-induktion för blå-vit färgscreening. En högspänningselektroporationsapparat krävs också.

Genotyp F [
´lac Iq, Tn 10(TetR)] mcr AΔ ( mrr - hsd RMS- mcr BC)φ 80 lac Z M15ΔΔlac X74 rec A1 ara D139Δ ( ara-leu )7697 gal U gal K rps L(StrR) end A1 nup G

Hitta de stammar och format som passar dina behov
• Vi erbjuder andra DH-stammar i kemiskt kompetenta och elektrokompetenta celler.
Elektroporationskyvetter med 0,1 cm (kat. nr. P41050), 0,2 cm (kat. nr. P45050) och 0,4 cm (kat. nr. P46050) mellanrum finns tillgängliga.
• De TOP10 stam finns i flera MultiShot format för applikationer med hög genomströmning.
• Vi erbjuder andra stammar för ssDNA-produktion, såsom DH12S (kat. nr. 18312017).